9月28日，2021 ELab 易贸实验室建设发展大会暨 2021 第五届中国医学检验实验室高峰论坛在南京顺利召开，由阔然基因举办的“全景·探微专题卫星会”如期举办，阔然与与会的病理、临床专家和同行一起探讨了“多重荧光免疫组化技术”的临床应用和发展。
大会荣幸地邀请到了苏州大学附属第一医院病理科主任郭凌川担任卫星会的主席，上海市实验医学研究院院长、上海临检中心/质量控制中心主任王华梁担任特邀嘉宾。主题演讲者包括南京鼓楼医院分子病理组长杨军主任、AKOYA资深产品专家钱帮国博士、阔然基因医学总监陈永武以及IDT技术专家庞志敏博士。
苏州大学附属第一医院病理科主任郭凌川主任首先做大会主席致辞，郭主任指出免疫组化技术（IHC）对于肿瘤组织学病理的诊断起着非常重要的作用，只有通过对肿瘤组织进行免疫组化分析才能最终对肿瘤进行定性和和分级。尽管当前IHC技术在病理诊断领域应用非常广泛，但其存在一些难以回避的劣势，例如IHC技术在一张切片上最多只能染1-2个指标（不含DAPI），很难完整的刻画高度异质性肿瘤的真实特性、虽然可以通过连续切片进行多指标的染色，但无法准确分析蛋白之间的相关性、最重要的是，其结果判读主要通过人为定性和半定量，存在一定的主观性。而二代病理技术（NGP）能在一张切片中同时检测多个标志物，配合分析软件能对多个标志物进行绝对定量分析，具有高重复性，高效率优势、更重要的是其能分析细胞组成、功能状态与细胞之间相互作用。我们相信二代病理技术（NGP）能大大助理肿瘤病理诊断的发展与变革。
郭凌川主任做主席发言
随后王华梁院长做领导致辞。王院长认为，肿瘤的诊治是世界性重大难题之一，肿瘤微环境研究是近年的前沿领域之一，为肿瘤诊治提供了新的希望。越来越多的研究表明：TIME下免疫和肿瘤相关分子的表达模式和功能，对于选择最有可能受益于免疫治疗的患者群体至关重要。一种新的多标记免疫组织化学染色/免疫荧光染色(multiplex immunohistochemistry/immunofluorescence, mIHC/IF)技术，能够获得关于细胞组成和空间排列的多通道信息,可以对肿瘤微环境进行高维分析。研究结果表明基于肿瘤微环境的评估可能优于已有的生物标志物，基于多标记免疫组化技术瘤微环境检测，能让我们更深入地了解肿瘤的发生机制，更有可能预测肿瘤对治疗的反应。
从新技术到临床应用，涉及到检测项目性能，临床验证，质量标准和流程的建立，以及临床专家不断达到共识的过程，阔然基因作为该领域的开拓者，前期做了大量的工作，但一项检测技术的普及，还需要行业各个方面的工作者一起努力。
我们相信在未来传统的分子检测技术联合新的检测技术（NGS+NGP）能给分子病理和分子临床研究带来新景象。
王华梁院长作领导致辞
接着来自AKOYA的钱帮国博士从技术的角度分享了在肿瘤诊疗干预中起到的作用。钱博士提到，如何提高肿瘤治疗的响应率，目前无论是NGS还是IHC检测，都不能满足临床需求。多色荧光定量病理分析技术上可以在一张切片上做到9色，意味着可以从一次检测中获得更多的信息。
大规模的标志物比较回归分析表明，多标技术相对其他免疫治疗相关标志物，能更好的预测药物的疗效。
随后钱博士介绍了几项应用该项技术研究肿瘤微环境的前沿文献，指出mIHC在原位空间信息获取、靶点表征方面拥有显著的优势，特别适合病理科应用。
钱帮国博士发言
南京鼓楼医院分子病理组长杨军主任做了《病理技术的发展历程与趋势》主题演讲，回顾了病理技术的技术发展历史与发展趋势。杨主任首先回顾了病理技术的起源与发展，指出病理技术的发展促进了病理学科的进步，并比较了现代分子病理技术的优劣势。杨主任认为，病理的发展趋势之一是整合诊断，即传统病理诊断+分子病理+超微病理等病理技术；另外就是被誉为“下一代病理技术”的多重荧光免疫组化（mIHC）技术，提供了肿瘤微环境的全景信息；最后是数字病理与AI人工智能的有机结合。以上三点共同打造了病理学科未来的发展方向。
杨军主任的主题发言
接下来是阔然基因的医学总监陈永武做了《下一代病理（NGP）在肿瘤临床检测和研究中的应用介绍》的介绍。
陈博士介绍了上海实验室的整套多重荧光免疫组化技术平台，包括病理诊断、多重染色标记、多光谱成像系统和图像分析系统，针对免疫检查点抑制剂的预测开发出了6款检测产品，其中与已批准的伴随诊断产品PD-L1表达相比，验证结果显示有较高的一致性。
此外，陈博士还介绍了阔然基因NGP技术平台业务开展模式，计划与各大医院高校药企合作开展肿瘤TME研究发现新分子标志物，将发现的新分子标志物转化成阔然IVD检测产品；同时提出了推动建立NGP行业联盟，主导建立NGP行业标准的三年计划。
陈永武博士做主题发言
mIHC技术能够在一张样品上进行6-8个靶点的成像和分析，采用类流式的方法对细胞表型、数量和活性进行定量评估，并提供细胞间的空间位置关系，三大技术创新保证了其无可比拟的优势。
Opal多重染色技术是一套多标记复染方案，允许在同一样本中使用同一种属来源的不同一抗进行标记，荧光基团在二抗上HRP酶的活化下以共价键的形式连接在抗原上，通过微波处理去除不稳定结合的一抗和二抗，以便于下一轮的标记。该方法检测灵敏度超高，荧光信号强且不易淬灭。
Vectra多光谱成像分析系统采用高精度的光谱重叠拆分技术，分离样本中的所有荧光信号，可消除荧光团交叉干扰和组织自发荧光干扰，获得高信噪比（扣除背景自发荧光）的图像和精准的批量定量分析。
InFormTM图像分析软件将智能组织识别算法与多标记分析融为一体，智能化将研究者的判读经验转变为客观算法，从而实现针对特定区域的定量统计分析。可获得组织细胞原位各种靶标类别、组分、表达量等信息，各靶标及其相互作用的空间定位、定性和定量等信息，全面、系统、直观、科学地解析这些信息对于研究疾病的发生发展机制，对于探讨疾病诊断和治疗疾病的有效方法有着重要意义。
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